歡迎光臨紅榮微再(上海)生物工程技術有限公司!
      服務熱線15021010459
      Article技術文章
      首頁 > 技術文章 > CAR-T細胞凍存袋分享細胞凍存方法

      CAR-T細胞凍存袋分享細胞凍存方法

      更新時間:2019-05-05瀏覽:4497次

         CAR-T細胞凍存袋分享CAR-T細胞凍存方法,包括以下步驟:

        (1)將培養的CAR-T細胞轉移至離心管中,在200-500g條件下,離心5-8min,棄掉上清液;

        (2)將離心后的細胞團先用DPBS重懸,確認細胞團被*打碎,在磁力架上靜止2-5分鐘,實現細胞跟磁珠的分離;

        (3)用移液管將細胞懸液轉移至新的離心管中,重復去磁珠操作兩次;

        (4)將清除磁珠后的細胞懸液在200-500g條件下,離心5-8min,棄掉上清液,備用;

        (5)根據需要凍存的細胞總數量,計算凍存介質的體積,將細胞重懸于凍存介質中;

        (6)將細胞分裝于凍存管或者凍存袋中,放置于-80℃超低溫冰箱中緩慢冷凍8-18小時,或者放置于程序降溫儀中按照相應程序降溫至-85℃;降溫結束后,將細胞凍存管或者凍存袋轉移至液氮中長期保存。

        回輸需要時,在液氮條件下運送至治療醫院,在37℃條件下快速解凍后,可以直接回輸給治療病人。

        所述步驟5中的凍存介質由氯化鈉、二甲基亞砜、葡萄糖、人血白蛋白、低分子葡聚糖和RPMI-1640基礎培養基組成,其中氯化鈉的質量濃度為0.45-0.9%,二甲基亞砜溶液的體積濃度為5-15%,葡萄糖的質量濃度為5-20%、人血白蛋白的質量濃度為10-50%,低分子葡聚糖的質量濃度為5-20%。

        優選的,所述步驟5中的凍存介質,其中氯化鈉的質量濃度為0.9%,二甲基亞砜溶液的體積濃度為10-15%,葡萄糖的質量濃度為5-10%、人血白蛋白的質量濃度為10-30%,低分子葡聚糖的質量濃度為5-10%。

        進一步優選的,所述步驟5中的凍存介質,其中氯化鈉的質量濃度為0.9%,二甲基亞砜溶液的體積濃度為10%,葡萄糖的質量濃度為5%,人血白蛋白的質量濃度為10%,低分子葡聚糖的質量濃度為5%。

        所述步驟5中CAR-T細胞的凍存密度為1×106個/ml-500×106個/ml。

       

      主站蜘蛛池模板: 亚洲狠狠婷婷综合久久久久| 狠狠色综合久色aⅴ网站| 青青综合在线| 亚洲成a人v欧美综合天堂下载| 色妞色综合久久夜夜| 激情综合网五月| 99久久国产主播综合精品| 亚洲伊人色欲综合网| 亚洲国产精品成人AV无码久久综合影院| 国产色综合天天综合网| 久久影院综合精品| 亚洲国产欧美国产综合久久| 狠狠色综合网站久久久久久久高清| 天天av天天翘天天综合网| 亚洲综合久久夜AV | 亚洲激情综合网| 熟女少妇色综合图区| 亚洲色欲色欲综合网站| 久久综合九色综合久99| 五月天激情综合网丁香婷婷| 日韩欧美色综合网站| 色综合天天综合网国产成人网| 色婷婷综合缴情综免费观看| 欧美亚洲综合色在| 亚洲综合色在线| 国产色综合一区二区三区| 亚洲国产精品综合久久网络| 欧美色综合久久久久久| 久久久久亚洲av综合波多野结衣| 99久久亚洲综合精品网站| 中文字幕亚洲综合久久2| 台湾佬综合娱乐| 欧美成人综合视频| 色综合天天综合网国产成人网| 亚洲欧洲日产国产综合网| 精品国产国产综合精品| 精品综合久久久久久88小说| 久久综合九色综合久99| 久久综合九色欧美综合狠狠| 狠狠色丁香婷婷久久综合五月| 国产综合亚洲专区在线|