關(guān)于細(xì)胞培養(yǎng)你了解多少呢？

  細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)是在細(xì)胞房中進(jìn)行，在超凈工作臺(tái)或生物安全柜中，把細(xì)胞處理好，根據(jù)需要加入細(xì)胞培養(yǎng)基，放入細(xì)胞培養(yǎng)瓶/皿或細(xì)胞培養(yǎng)板中，再放到帶有5% CO2 的37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

 細(xì)胞培養(yǎng)4要素
     1.類型：懸浮細(xì)胞/貼壁細(xì)胞
     2.培養(yǎng)基：（無）血清/Buffer/抗生素/無菌過濾
     3.培養(yǎng)環(huán)境：CO2濃度/O2濃度
     4.培養(yǎng)耗材：處理&未處理表面/特殊包被

 流程：

 1. 剪切組織 先將所取得的組織清洗剪切至糊狀，靜置片刻后，用吸管吸去上層液體，加入適當(dāng)?shù)木彌_液再清洗一次。

 2. 消化分離 消化分離的目的是將細(xì)小的組織塊消化分離成細(xì)胞團(tuán)或分散的單個(gè)細(xì)胞，以利于進(jìn)一步的培養(yǎng)，常用的消化酶有胰蛋白酶和膠原酶。

 3. 培養(yǎng) 細(xì)胞懸液用計(jì)數(shù)板進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。用培養(yǎng)液將細(xì)胞數(shù)調(diào)整為實(shí)驗(yàn)所需密度，分裝于培養(yǎng)皿/培養(yǎng)板/培養(yǎng)瓶中。置CO2培養(yǎng)箱內(nèi)，5％CO2，37℃靜置培養(yǎng)。一般3～5d，原代培養(yǎng)細(xì)胞可以黏附于瓶壁，并伸展開始生長，可補(bǔ)加原培養(yǎng)液量1／2的新培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)2～3d后換液，一般7～14d可以長滿瓶壁，進(jìn)行傳代。

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