了解一下使用功能細(xì)胞培養(yǎng)基有哪些是必須

 　　細(xì)胞培養(yǎng)基既是培養(yǎng)細(xì)胞中供給細(xì)胞營養(yǎng)和促使細(xì)胞生殖增殖的基礎(chǔ)物質(zhì)，也是培養(yǎng)細(xì)胞生長和繁殖的生存環(huán)境。

　　下面讓我們一起來了解一下使用功能細(xì)胞培養(yǎng)基有哪些是必須的吧。

　　一、細(xì)胞培養(yǎng)必需的溶液

　　平衡鹽水(BSS):Hanks 液和Earle液是常用的BSS基礎(chǔ)溶液。PH調(diào)整液:3.7%、5.6%、7.4%的NaHCO3溶液、HEPES溶液(二乙烷磺酸)

　　細(xì)胞消化液:胰蛋白酶溶液、EDTA溶液、膠原酶溶液。

　　二、抗生素溶液:

　　1)青、鏈霉素，每毫升培養(yǎng)液含100U青霉素和100ug鏈霉素。

　　2)卡那霉素:終濃度為50ug/ml培養(yǎng)液。

　　3)制霉菌素:濃度25U/ml，小瓶分裝，每瓶一次用完。

　　常用的動物血清主要有牛血清和馬血清。牛血清分為胎牛血清和犢牛血清，前者來源少，價格高;后者要求剛產(chǎn)下尚未哺乳的小牛，因?yàn)椴溉楹蟮男∨Ｑ逯锌赡芎懈鼜?fù)雜的成分。血清中已知的成分主要有蛋白質(zhì)、氨基酸、葡萄糖、激素等。蛋白質(zhì)主要是白蛋白和球蛋白。

　　氨基酸是細(xì)胞合成蛋白質(zhì)的基本成分，氨基酸中有12種是細(xì)胞本身不合成的，必須由培養(yǎng)液提供。激素有胰島素、生長激素和多種生長因子如表皮生長因子、成纖維細(xì)胞生長因子、增殖刺激因子(MSA)、類胰島素生長因子(IGFl、IGF2)等。

　　水解乳蛋白、膠原是另外兩種較好的天然培養(yǎng)基成分。水解乳蛋白是乳白蛋白的水解產(chǎn)物，呈蛋黃色粉末狀，富含氨基酸。一般配制成0.5%溶液，微酸性。膠原是從動物真皮中提取的，具改善細(xì)胞表面特性促使其附著生長的作用。

　　合成培養(yǎng)基

　　1951年厄爾開發(fā)了供動物細(xì)胞體外生長的人工合成培養(yǎng)基(MEM)。合成培養(yǎng)基的種類相當(dāng)多。合成培養(yǎng)基成分已知，便于對實(shí)驗(yàn)條件的控制。但與天然培養(yǎng)基相比，有些天然的未知成分尚無法用已知的化學(xué)成分所替代，因此，細(xì)胞培養(yǎng)中使用的基礎(chǔ)合成培養(yǎng)基還必須加入一定量的天然培養(yǎng)基成分，以克服合成培養(yǎng)基的不足。普遍的作法是加入小牛血清。

　　動物血清成分復(fù)雜，各種生物大小分子混合在一起，有些成分至今尚未搞清楚。血清對細(xì)胞生長很有效，但后期對培養(yǎng)產(chǎn)物的分離、提純以及檢測造會成一定困難。另外高質(zhì)量的動物血清來源有限，成本高，限制了它的大量使用。

　　無血清培養(yǎng)基不加動物血清，在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中加入細(xì)胞生長有效因子，激素等。