簡要描述：Dojindo Biotin Labeling Kit-NH2生物素標記試劑盒
整個標記過程僅需1個小時
整個標記過程在1支過濾管中進行
熒光標記抗體回收率高
適用于50-200 μg的IgG

產品英文名稱：Biotin Labeling Kit-NH2
產品中文名稱：生物素標記試劑盒- NH2

Biotin Labeling Kit-NH2 產品特性
整個標記過程僅需1個小時
整個標記過程在1支過濾管中進行
熒光標記抗體回收率高
適用于50-200 μg的IgG

Biotin Labeling Kit-NH2 產品描述
該試劑盒主要用于制備生物素標記的蛋白質，用于酶免疫分析（EIA）。NH2-reactive biotin是試劑盒的成分之一，它含有琥珀酰亞胺基（NHS），能與蛋白質或者其它分子的氨基反應。該試劑盒中包含了標記所需的全部試劑，標記過程十分 簡便。只需將NH2-reactive biotin加入到IgG溶液中，37℃培養10分鐘即可。每個IgG分子平均能夠和5-8個生物素分子結合。過量的生物素分子能夠使用過濾管將其除去。
Biotin Labeling Kit-NH2 試劑盒內容
- NH2-Reactive Biotin .......................... 3 tubes
- WS Buffer ......................................... 4 ml x 1
- Reaction Buffer ................................. 500 μl x 1
- Filtration Tube .................................. 3 tubes

標記IgG操作步驟
（1）將100 μl WS buffer以及含有100 μg IgG的樣品溶液加入到過濾管中。a）
（2）8,000-10,000 g離心10分鐘。b）
（3）將10 μl DMSO加入到NH2-reactive biotin中并用移液器吹打使其溶解。c）
（4）將100 μl Reaction buffer以及8 μl NH2-reactive biotin溶液加入到過濾管中，吹打使其混合。d）
（5）將過濾管放入培養箱中，37℃培養10分鐘。
（6）將100 μl WS buffer加入到過濾管中，8,000-10,000 g離心10分鐘，b）除去濾液。
（7）將200 μl WS buffer加入到過濾管中，8,000-10,000 g離心10分鐘，b）重復該步驟一次。
（8）將200 μl WS buffer加入到過濾管中吹打10-15次來回收標記產物。e）將該溶液轉移到0.5 ml試管中，在0-5℃下保存。
  a）樣品溶液的體積不應超過100 μl。如果抗體濃度低于1 mg/ml，重復步驟1和2直至總的IgG聚積量達到100 μg。如果聚積過程中濾液的體積超過400 μl，則在進行后續的離心操作前應除去濾液。
  b）如果溶液在離心后仍然殘留在膜上，可以再離心5分鐘或者適當增加轉速。
  c）NH2-reactive biotin在管子的底部，向管底加入10 μl DMSO，吹打數次使其溶解。
  d）如果IgG的量為200 μg，在步驟4時加入所有的NH2-reactive biotin溶液。
  e）并不一定要使用WS buffer來回收標記產物，可以選擇任何適合于該實驗的緩沖液來替代。

Biotin Labeling Kit-NH2 注意事項
用該試劑盒標記的蛋白質的分子量要>50,000。
在標記過程中，IgG或者biotin-IgG標記物始終在Filtration tube的濾膜上。
如果IgG溶液中含有分子量>10,000的其他蛋白質，如BSA或明膠時，在使用該試劑盒標記前，先要純化IgG溶液。IgG溶液能夠用IgG Purification Kits（不包含于本試劑盒中）來純化。
如果IgG溶液含有小的不溶物，離心后取上清液來進行標記。
如果長時間不使用，建議您把試劑盒中的標記試劑NH2-reactive biotin放在-20℃冰箱中保存，不需要充氮氣，可以更好地保持標記試劑的活性，但請不要把其它試劑和過濾管放到-20℃冰箱中，仍請放在0-5℃冰箱中保存。

華雅再生醫學工程技術有限公司是一家為干細胞研究員提供干細胞無血清培養基，支原體檢測試劑盒，心肌細胞株，人間充質干細胞株，凍存管凍存盒，臍帶間充質干細胞凍存袋，細胞實驗耗材等進口品牌高質量產品。專注干細胞研究，關注干細胞治療產品，購買干細胞產品請到華雅再生醫學工程公司。