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“2014年P(guān)eproTech公司推出自己的流式細(xì)胞術(shù)產(chǎn)品品牌，即BioGems。BioGems意為生物鉆石，其產(chǎn)品涵蓋多種熒光標(biāo)記的流式抗體、具有生物活性的功能性抗體，以及流式細(xì)胞術(shù)輔助試劑，如溶血?jiǎng)┖推颇┑?。BioGems產(chǎn)品全部在美國(guó)生產(chǎn)，相信其優(yōu)異的品質(zhì)和低于其它流式廠商的價(jià)位將能為廣大用戶提供更好的選擇。”
Biogems的流式抗體、ELISA試劑盒等產(chǎn)品一向具有價(jià)格優(yōu)勢(shì)。2017年Biogems將優(yōu)勢(shì)發(fā)揮到底，截止12月底推出一系列產(chǎn)品*活動(dòng)。
一 Biogems流式抗體
步驟
人T細(xì)胞檢測(cè)用抗體
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品貨號(hào) | 克隆號(hào) | 同型對(duì)照 | 規(guī)格 | 單價(jià) |
Anti-HumanCD3FITC | 05131-50-25 | UCHT1 | Mouse IgG1, kappa | 25 tests | 560元 |
Anti-Human CD3 PE | 05131-60-25 | UCHT1 | Mouse IgG1, kappa | 25 tests | 770元 |
Anti-Human CD3 APC | 05131-80-25 | UCHT1 | Mouse IgG1, kappa | 25 tests | 910元 |
Anti-Human CD4 FITC | 06121-50-25 | RPA-T4 | Mouse IgG1, kappa | 25 tests | 560元 |
Anti-Human CD4 PE | 06111-60-25 | OKT4 | Mouse IgG1, kappa | 25 tests | 770元 |
Anti-Human CD4 APC | 06121-80-25 | RPA-T4 | Mouse IgG1, kappa | 25 tests | 980元 |
Anti-Human CD8a FITC | 06121-80-25 | RPA-T8 | Mouse IgG1, kappa | 25 tests | 630元 |
Anti-Human CD8a PE | 10131-60-25 | RPA-T8 | Mouse IgG1, kappa | 25 tests | 700元 |
Anti-Human CD8a APC | 10131-80-25 | RPA-T8 | Mouse IgG1, kappa | 25 tests | 980元 |
人TH1/TH2/TH17染色所需抗體及輔助試劑
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號(hào) | 規(guī)格 |
Anti-Human CD3 PE | 05111-60 | 25 test/100 tests |
Anti-Human CD8a FITC | 10111-50 | 25 test/100 tests |
Anti-Human IFN gamma APC | 80811-80 | 25 test/100 tests |
Anti-Human IL-4 PE-Cy7 | 81111-77 | 25 test/100 tests |
Anti-Human IL-17A PE | 73821-60 | 25 test/100 tests |
Mouse IgG1 Isotype Control APC | 44212-80-100 | 100 mg |
Mouse IgG1 Isotype Control PE-Cy7 | 44212-77-100 | 100 mg |
Mouse IgG1 Isotype Control PE | 44212-60-100 | 100 mg |
Brefeldin A | 2031560-5mg | 5 mg |
Ionomycin (calcium salt) | 5608212-1mg | 1 mg |
Phorbol 12-myristate 13-acetate | 1652981-1mg | 1 mg |
Permeabilization Buffer (10X) | 92110-00-150 | 150 ml |
Transcription Factor Fixation/Permeabilization Diluent | 92160-00-160 | 160 ml |
Transcription Factor Fixation/Permeabilizatio Concentrate | 92550-00-50 | 50 ml |
人間充質(zhì)干細(xì)胞鑒定抗體
細(xì)胞表面流式染色操作步驟：人間充質(zhì)干細(xì)胞鑒定方案
1、準(zhǔn)備細(xì)胞：取培養(yǎng)的細(xì)胞離心（300 g/5min），棄去上清, 加入一定量PBS洗滌一次，棄去上清，彈散細(xì)胞，細(xì)胞重懸到5*106~10*106之間；
2、取100 ml的細(xì)胞于EP管或流式管內(nèi)，分三管染色：
*管Anti-human CD90 FITC, Anti human CD105 APC，Anti-human CD45 PE-Cy7各加5 ml；
第二管 Anti-human HLA-RA FITC, Anti-human CD34 PE-Cy7， Anti-human CD73 APC各加5 ml；
第三管Mouse IgG1 K Isotype Control FITC 0.6 ml， Mouse IgG1 Isotype Control PE-Cy7 1.2 ml，Mouse IgG1 Isotype Control APC 1.2 ml 。
3、加入相應(yīng)的抗體后混勻，建議彈管子，盡量不用槍頭直接吹打，室溫避光孵育15 min，染色過(guò)程中再混勻一次；
4、染色完成后加入1 ml的PBS洗滌細(xì)胞，離心300 g/5min；
5、棄去上清，彈散細(xì)胞，加入500 ml PBS重懸，上機(jī)檢測(cè)。
注意：a.同型對(duì)照是根據(jù)染色抗體的用量來(lái)計(jì)算的，所以每種同型對(duì)照可能加入量可能不一樣（具體可看后文同型對(duì)照章節(jié)的介紹）。
b.先上機(jī)檢測(cè)同型對(duì)照管，各檢測(cè)通道以這一管的信號(hào)設(shè)為陰性，在上機(jī)檢測(cè)抗體染色管。
c.zui后結(jié)果的顯示用峰圖來(lái)表示，每種抗體的檢測(cè)結(jié)果都與對(duì)應(yīng)的同型對(duì)照染色結(jié)果疊加展示（ overlay ）。
產(chǎn)品訂購(gòu)信息
品牌 | 產(chǎn)品編號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
BioGems | 03011-50 | Anti-Human CD90 (Thy-1) FITC | 25 test/100 tests |
BioGems | 07111-77 | Anti-Human CD45 PE-Cy7 | 25 test/100 tests |
BioGems | 17111-80 | Anti-Human CD105 (Endoglin) APC | 25 test/100 tests |
BioGems | 74111-50 | Anti-Human HLA-DR FITC | 25 test/100 tests |
BioGems | 06411-77 | Anti-Human CD34 PE-Cy7 | 25 test/100 tests |
BioGems | 05811-80 | Anti-Human CD73 APC | 25 test/100 tests |
BioGems | 44212-50 | Mouse IgG1 K Isotype Control FITC | 100 mg |
BioGems | 44212-77 | Mouse IgG1 Isotype Control PE-Cy7 | 100 mg |
BioGems | 44212-80 | Mouse IgG1 Isotype Control APC | 100 mg |
注意：細(xì)胞治療協(xié)會(huì)間充質(zhì)和組織干細(xì)胞委員會(huì)2006年提出了MSC鑒定的zui低標(biāo)準(zhǔn)，關(guān)于細(xì)胞表型的要求是表達(dá)CD90, CD105和CD73不表達(dá)CD45, CD34, CD14或CD11b, CD79a或CD19和HLA-DR；陽(yáng)性指標(biāo)都需要染色，陰性指標(biāo)一般選擇2-3個(gè)指標(biāo)，因?yàn)槭亲黾?xì)胞表型鑒定，所以要配齊同型對(duì)照。
人NK細(xì)胞流式鑒定方案
品牌 | 產(chǎn)品編號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
BioGems | 05131-77 | Anti-Human CD3 PE-Cy7 | 25 tests/100 tests |
BioGems | 08211-50 | Anti-Human CD16 FITC | 25 tests/100 tests |
BioGems | 08631-80 | Anti-Human CD56 (NCAM) APC | 25 tests/100 tests |
BioGems | 44212-77-100 | Mouse IgG1 Isotype Control PE-Cy7 | 100 mg |
BioGems | 44212-50-100 | Mouse IgG1 Isotype Control FITC | 100 mg |
BioGems | 44212-80-100 | Mouse IgG1 Isotype Control APC | 100 mg |
小鼠外周血淋巴細(xì)胞染色
品牌 | 產(chǎn)品編號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
BioGems | 05122-80 | Anti-Mouse CD3e APC | 25 mg/100 mg |
BioGems | 06122-60 | Anti-Mouse CD4 PE | 25 mg/100 mg |
BioGems | 10122-50 | Anti-Mouse CD8a FITC | 25 mg/100 mg |
BioGems | 64010-00-100 | 10X RBC Lysis Buffer | 100ml |
人NK細(xì)胞流式和小鼠外周血淋巴細(xì)胞染色詳細(xì)操作步驟參見(jiàn)Biogems操作手冊(cè)。
二 CAR-T細(xì)胞治療產(chǎn)品3
T細(xì)胞刺激抗體2
“SAFIRE純化CD3單抗(clone: OKT3)可以與TCR復(fù)合物結(jié)合，激活T細(xì)胞；
SAFIRE純化CD28單抗(clone: CD28.2)是T細(xì)胞激活、增殖的輔助刺激分子。
SAFIRE(Sodium Azide Free Immensely Reduced Endotoxins) 類產(chǎn)品是BioGems品牌下的功能性抗體產(chǎn)品，經(jīng)特殊工藝生產(chǎn)、純化，具有諸多優(yōu)點(diǎn)”。
產(chǎn)品訂購(gòu)信息
品牌 | 貨號(hào) | 產(chǎn)品描述 | 包裝 |
PeproTech/BioGems | 05121-25-500 | Anti-Human CD3 SAFIRE Purified （克隆號(hào)OKT3） | 500μg |
PeproTech/BioGems | 10311-25-500 | Anti-Human CD28 SAFIRE Purified（克隆號(hào)CD28.2） | 500μg |
CAR-T細(xì)胞的檢測(cè)抗體
產(chǎn)品描述 | 熒光染料 |
Anti-Human CD3 | FITC/PE/APC |
Anti-Human CD4 | FITC/PE/APC |
Anti-Human CD8a | FITC/PE/APC |
Anti-Human CD25 | PE/ PerCP-Cy5.5/ PE-Cy7/APC |
Anti-Human CD27 | BG Violet 450/ FITC/ PE /PE-Cy7/APC/APC-Cy7 |
Anti-Human CD28 | FITC/ PE /PerCP-Cy5.5/PE-Cy7/APC |
Anti-Human CD45RA | BG Violet 450/ FITC/PerCP-Cy5.5 /PE-Cy7/APC |
Anti-Human CD45RO | Biotin/FITC/PE/PerCP-Cy5.5/APC |
Anti-Human CD56 (NCAM) | PE/APC/FITC/PE-Cy7/PE/FITC/APC |
Anti-Human CD57 | FITC |
Anti-Human CD69 | FITC/PE |
Anti-Human CD107a (LAMP-1) | FITC/PE/APC |
Anti-HumanCD127(IL-7 Receptorα) | PE/APC/PE-Cy5
|
Anti-Human CD184 (CXCR4) | Biotin/PE/APC |
Anti-Human CD197 (CCR7) | FITC/PE |
胞內(nèi) |
|
Anti-Human IFN gamma | FITC/PE/PE-Cy7/APC |
Anti-Human Perforin | FITC/PE/APC |
CAR-T細(xì)胞因子產(chǎn)物鑒定
IL-2 和 IFN-γ ELISA 試劑盒
人 | 貨號(hào) |
IL-2 | PK60568 |
IFN-Gamma | PK01579 |
細(xì)胞凋亡
CD4和CD28抗體。參見(jiàn)CAR-T細(xì)胞的檢測(cè)抗體。
CFSE（Carboxyfluorescein diacetate succinimidyl ester）稀釋分析
Biogems熒光染料CFSE是一種可穿透細(xì)胞膜的熒光染料，能與胞內(nèi)的細(xì)胞骨架蛋白中的游離胺基反應(yīng)，zui終形成具有熒光的蛋白復(fù)合物，CFSE染料隨著細(xì)胞的分裂增殖可被子代細(xì)胞均勻繼承，其含量的衰減與細(xì)胞分裂次數(shù)成正比，這種現(xiàn)象可以在488nm的激發(fā)光下，采用流式細(xì)胞儀檢測(cè)分析，通過(guò)檢測(cè)到細(xì)胞熒光強(qiáng)度不斷的降低，進(jìn)一步分析得出細(xì)胞分裂增殖的情況。
訂購(gòu)信息
品牌 | 產(chǎn)品描述 | 貨號(hào) | 包裝 | 價(jià)格 |
PeproTech/BioGems | CFSE | 63310-00-500 | 500ug | 1120 |
重刺激和體外共培養(yǎng)
共培養(yǎng)3天后，CAR-T細(xì)胞用CD3和CD19抗體染色。
三PeproTech/BioGems ELISA試劑盒
Human | 貨號(hào) | BioGems |
EGF | PK01133 | $5,040.00 |
HGF | PK14210 | $5,180.00 |
IFN-Gamma | PK01579 | $4,830.00 |
IL-1 Beta | PK01584 | $4,830.00 |
IL-2 | PK60568 | $4,830.00 |
IL-4 | PK05112 | $4,830.00 |
IL-6 | PK05231 | $4,830.00 |
IL-10 | PK22301 | $4,830.00 |
IL-12 | PK29459 | $4,830.00 |
IL-13 | PK35225 | $5,460.00 |
IL-17A | PK16552 | $4,830.00 |
PDL1 | PK9NZQ7 | $5,740.00 |
TGF-Beta1 | PK01137 | $5,740.00 |
TNF-Alpha | PK01375 | $4,830.00 |
VEGF | PK15692 | $5,110.00 |
四 PeproTech/BioGems *
BioGems 佛波酯PMA
PMA(Phorbol 12-myristate 13-acetate)是一種佛波酯，常用于激活某些類型的蛋白激酶C(PKC)，如group A (α, βI, βII, γ) 和group B (δ, ε, η, θ)異構(gòu)體。佛波酯(包括PMA)的結(jié)構(gòu)類似于二?；视?，可通過(guò)與PKC的C1域相互作用而活化PKC異構(gòu)體。通過(guò)PCK，PMA也活化某些MAP激酶途徑。PMA高濃度長(zhǎng)時(shí)間作用于細(xì)胞可引起總PKC活性及其成瘤性的降低，而低濃度可能起保護(hù)作用。此外，PMA也促進(jìn)造血分化。PMA的水溶性約是PDBu(phorbol-12,13-dibutyrate)的10倍，提示PMA更適合用于細(xì)胞學(xué)研究。
Biogems紅細(xì)胞裂解液（RBC Lysis Buffer）
4大優(yōu)勢(shì)：
*，有*
不含固定劑，溶血后細(xì)胞活性好
溶血充分，分群清晰
無(wú)菌，溶血后細(xì)胞可以繼續(xù)培養(yǎng)
產(chǎn)品名稱 | 貨號(hào) | 規(guī)格 | 單價(jià) | * |
Anti-Human CD3 SAFIRE Purified | 05121-25-500 | 500 μg | ￥4,130 | ￥1,652 |
Anti-Human CD28 SAFIRE Purified | 10311-25-500 | 500 μg | ￥3,640 | ￥1,456 |
Phorbol 12-myristate 13-acetate（PMA） | 1652981-1mg | 1mg | ￥880 | ￥1,320 |
Brefeldin A | 2031560-5mg | 5mg | ￥880 | |
Ionomycin (calcium salt) | 5608212-1mg | 1mg | ￥880 | |
10X RBC Lysis Buffer | 64010-00-100 | 100ml | ￥700 | ￥500 |
Biogems破膜劑
貨號(hào) | 產(chǎn)品描述 | 規(guī)格 | 單價(jià) | * |
92550-00-50 | Transcription Factor Fixation/Permeabilization Concentrate | 50 ml | 1050 |
|
92160-00-160 | Transcription Factor Fixation/Permeabilization Dilute | 160 ml | 420 | |
92110-00-150 | Permeabilization Buffer(10X) | 150 ml | 1030 | |
|
| 總價(jià) | 2500 | 1600 |
活動(dòng)時(shí)間：截止2017年12月31日
參考：
1.派普泰克*資料.
2.J Clin Invest. 2011.CD28 costimulation improves expansion and persistence of chimeric antigen receptor–modified T cells in lymphoma patients.Barbara Savoldo,et al.
3.Blood 2014.Closely related T-memory stem cells correlate with in vivo expansion of CAR.CD19-T cells and are preserved by IL-7 and IL-15.Yang Xu,et al.
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